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細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),其中原核或真核細(xì)胞在受控條件下生長。大規(guī)模哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)被廣泛用于生物技術(shù)中,特別是用于生產(chǎn)疫苗,蛋白質(zhì),酶,抗體和激素。細(xì)胞培養(yǎng)還用于許多研究*域,特別是在制藥*域,其中將細(xì)胞用作研究許多疾病(例如癌癥或心臟病)的模型。細(xì)胞用于靶標(biāo)鑒定和驗(yàn)證,基于細(xì)胞的測定法(用于高通量篩選),通透性測定法和治療性蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。還培養(yǎng)植物細(xì)胞以研究生物學(xué)過程,進(jìn)行遺傳研究或產(chǎn)生次級產(chǎn)物,例如重組蛋白。

一個(gè)人可以生長從組織中分離的細(xì)胞(原代細(xì)胞),也可以使用已建立的永生化細(xì)胞系中的細(xì)胞。原代細(xì)胞(除非它們源自腫瘤組織)僅具有有限的壽命,而永生化的細(xì)胞系可以無限期增殖。還可以將原代細(xì)胞與永生化細(xì)胞系融合以產(chǎn)生雜交瘤。該技術(shù)用于產(chǎn)生單克隆抗體。干細(xì)胞在醫(yī)學(xué)和研究中的使用正變得越來越流行。

細(xì)胞以懸浮液或貼壁培養(yǎng)物(單層)的形式在特定的生長培養(yǎng)基中生長。必須針對所用細(xì)胞的類型專門選擇培養(yǎng)基。細(xì)胞培養(yǎng)基通常包含氨基酸,葡萄糖,維生素,無機(jī)鹽,脂質(zhì),并可能包含動物血清,生長因子,激素,抗生素,抗氧化劑和其他成分。培養(yǎng)基的類型包括基于血清,無血清,無動物,無蛋白質(zhì)或化學(xué)成分。可以添加補(bǔ)充劑,例如小牛血清。為了維持細(xì)胞生長的適當(dāng)條件,使用培養(yǎng)箱,例如特定的溫度和氣體混合物(對于哺乳動物細(xì)胞,通常為37°C,5%CO 2)。

為了保持細(xì)胞健康和成長,它們需要有足夠的營養(yǎng),因此需要定期補(bǔ)充培養(yǎng)基。此外,當(dāng)貼壁細(xì)胞系達(dá)到融合狀態(tài)(覆蓋所有可用表面積)時(shí),需要對其進(jìn)行繼代培養(yǎng)以繼續(xù)生長。為了防止細(xì)胞污染,必須格外小心。污染可以是化學(xué)的(由于化學(xué)物質(zhì),水或用于制備培養(yǎng)基或塑料的添加劑的污染)或生物的(細(xì)菌,霉菌,酵母,支原體,病毒,原生動物等)。
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